Проблеми герметизації та забруднення в багатовимірних табличках культури клітин

Завантаження та поводження з мультипроблемними тарілками з культури клітин:

Пластина клітинної культури також дотримується принципу суворого асепсису при виконанні клітинних операцій. Усі операції повинні бути стандартизованими та науковими, і не спричинить додаткового впливу на ріст клітин. Найпоширенішою проблемою є те, як забезпечити рівномірність клітин після додавання зразка та мінімізації впливу зміни середовища на стан росту клітин.

Запитайте:
Кришки з 96 та 24-лункових культурних тарілок або чашок Петрі дуже пухкі, що зручно для вентиляції, але чи будуть бактерії, цвіль та інші забруднювачі?

Відповідь:
Кришка дуже вільна, яка належить до напівпровідної культури, і мета цього-провітратися (насправді це зробити СО2 поза культурною стравою повністю обмінюється з культурною стравою та підтримувати значення pH культури середній).
Все має переваги та недоліки, що, звичайно, збільшує можливість забруднення. Крім того, це призводить до випаровування рідини в страві, що помітно для точного дозування наркотиків. Тому необхідні два заходи: a. Повітря в інкубаторі повинно бути чистим (регулярне ультрафіолетове світло, очищення спирту, а інкубатор повинен бути відкритий і закритий якомога менше) b. Вологість в інкубаторі завжди повинна зберігатися на 100% (раковина з стерильною дистильованою водою, розміщеною в інкубаторі).
Так само, як і чашка Петрі, це також ємність з кришкою догори ногами, і вона не буде забруднена. В основному через негативний тиск повітряного потоку, що генерується за допомогою краю кришки "L", до пилу прикріплені мікроорганізми, і пил, що переноситься потоком повітря, не може проходити через край кришки, що генерує негативний тиск. Ефект вентиляції здійснюється лише через дифузію повітря, і не буде генерується повітряний потік, тому він лише дихає і не проникає в бактерії.

Запитайте:
Використовуючи 24-лункову пластину, в деяких свердловинах є операції (на надпліковій лавці), а в інших свердловинах є клітини. Я переживаю, що це спричинить забруднення. Я не знаю, на що звернути увагу?

Відповідь:
Якщо операція стандартизована на ультрашклішній лавці, це повинно бути нормально. Я думаю, ви можете повною мірою використовувати обкладинку культурної пластини, спробувати викрити лише отвори, які слід керувати, і накрити інші отвори кришками.
Розгляньте всебічно перед використанням та повним використанням усіх отворів; Якщо вам потрібно використовувати лише кілька отворів, ви можете використовувати лише одну сторону, а решту накрити кришкою. Я звик спочатку використовувати правий отвір (зручно додати зразки до правої руки).

Під час роботи використовуйте кілька скляних гір, щоб підняти одну сторону дошки, не відкривайте обкладинку повністю, як правило, немає проблем.
Нерівномірне розподіл клітин та рішення

Запитайте:
Клітини прищеплюються на культурній пластині, а клітини завжди збираються в периферичній частині, як з нею боротися?

Відповідь:
Чи можу я запитати, як ваші клітини змішані? Це піпетування чи струшування культурної пластини? Якщо це останнє, і якщо його похитнути по колу, дуже ймовірно, що клітини будуть кинуті на периферичну частину через відцентрову силу, що призведе до меншої кількості клітин посередині. Більше чотирьох тижнів!
Ось хороший спосіб: перед тим, як вирощувати насіннєву пластину, покладіть тарілку для культури в інкубатор на кілька годин насичення, а потім вийміть її. Сила повинна бути світлом при посадці клітин. Додавання повільно дозволяє клітинній суспензії втікати в лунки пластини, а культивовані клітини в основному ростуть рівномірно. Не забудьте ніколи не тремтитися шейкер, інакше ваші клітини зігнуться разом, як ви сказали.
Чим менший діаметр отвору культурної пластини, тим очевиднішим є це явище. Це явище неминуче для 24 та 96-лункових пластин, оскільки рідина прилягає до стінки, щоб культурний розчин у криниці не утворював рідкий рівень, а периферію висока, як і увігнуте дзеркало. Однак, використовуючи ці два види пластин для отвору, неможливо додати достатню кількість культурного розчину через необхідність додаткового втручання, щоб клітини з’являлися «збіркою» разом із культурним рішенням. Це залежить від того, які показники потрібно спостерігати. Якщо це MTT, імуногістохімія вплине на результати через шарування клітин.
Під час перетравлення клітин зверніть увагу на піпетку рівномірно, щоб уникнути клітинних скупчень, а кількість культурного розчину в свердловині повинна бути достатньою. Як правило, додайте достатню кількість культурного розчину при прищепленні та змініть рішення один раз при додаванні втручання. Кількість культурного розчину, що додається до розчину втручання, дорівнює кількості культурного розчину під час щеплення, в цьому випадку явище "набору краю" буде вдосконалено, тому ви можете спробувати.

Запитайте:
Що я зробив, - це експеримент з утворення нальоту. Найкраще розподілити клітини рівномірним шаром. Більшість отворів є чудовими, коли вірус прищеплюється, а деякі з них не є рівномірними. Існують великі відмінності в клітинній групі. Я хотів би запитати вас, який метод ви використовуєте під час додавання клітин?

Відповідь:
Пібота клітини в одноклітинній суспензії після травлення! Переконайтесь, що кількість клітин у кожній лунці є послідовною при розщепленні пластини!
Звичайно, є також фактори обробки. Паралелізм між свердловинами також дуже важливий. Наприклад, при додаванні ліків змішайте ліки після розведення, щоб переконатися, що концентрація кожної лунки була послідовною!
Крім того, при додаванні клітин та лікарських засобів слід додати групу та контрольну групу в свою чергу, щоб уникнути різниці в щільності клітин та концентрації лікарських засобів, спричинених послідовністю додавання зразків!

Запитайте:
Вдуття вже рівномірне, але дошкільні, 6 отворів і 24 отвори завжди дещо нерівні, і трохи сконцентровані посередині. Більше того, очевидно, що підрахунок робиться, і через день -два щільність кожного отвору різна, що вплине на виявлення. Чи є хороший шлях?

Відповідь:
Якщо ви використовуєте піпетку з пастуром, не смокчуть занадто багато щоразу, оскільки клітини в піпетці автоматично тонуться, часто кількість клітин у перших кількох отворах велика, а клітинна суспензія часто рівномірна, і рідина буде Дотримуйтесь маршруту S-форми.
Якщо ви використовуєте піпетку, наконечники слід обробляти та вилучити, щоб уникнути пошкодження клітин, так що кожного разу, коли приймається рідина, відповідає свердловині. Більш точно додати отвір один на один із кінчиком. Але також зверніть увагу на змішування підвіски.

Щоб налаштувати паралельну групу, N повинно бути достатньо великим (ви можете її обчислити).

Не струшуйте після покриття, оскільки струшування призведе до агрегування клітин до центру. Найкраще один раз.

Пориста клітинна культурна пластина Yongyue Medical завжди розглядала контроль якості як життя підприємства та продовжувала постійне вдосконалення конкурентоспроможності підприємства. Компанія завжди дотримується підприємства духу дотримання законів та правил, суворо з самодисципліною, поблажливою та наважиться брати на себе відповідальність як стандарт в експлуатації, підтримку та розширення ринку з чудовою якістю та відмінним обслуговуванням та задоволення потреби клієнтів у найбільшій мірі. . Виграш з клієнтами-це наша мета розвитку. Yongyue medical! Ваш довірений партнер. Ми готові щиро співпрацювати з вами, щоб створити краще майбутнє.